Background 

細(xì)胞因子風(fēng)暴（cytokine stormsyndromes, CSS）是人體被微生物感染或CAR-T細(xì)胞輸入后，引起體液內(nèi)多種細(xì)胞因子如IL-1、IL-6、IL-17、G-CSF、GM-CSF、MCP-1、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ等迅速大量產(chǎn)生的現(xiàn)象，它是引起急性呼吸窘迫綜合癥和多器官衰竭的重要原因。這是一種全身性失控炎癥反應(yīng)，常由微生物感染引起，在抵御病原體侵襲時，免疫細(xì)胞會分泌大量細(xì)胞因子，細(xì)胞因子又轉(zhuǎn)而刺激免疫細(xì)胞。通常情況下，炎癥反應(yīng)會得到一定調(diào)控，然而在某些情況下，這種調(diào)節(jié)機(jī)制失靈，機(jī)體內(nèi)免疫細(xì)胞被大量活化，活化的細(xì)胞分泌更多細(xì)胞因子，產(chǎn)生正向循環(huán)，發(fā)生細(xì)胞因子風(fēng)暴。

Fig 1.細(xì)胞分子風(fēng)暴
 

SARS-CoV-2、流感病毒等感染，均可導(dǎo)致細(xì)胞因子風(fēng)暴，被認(rèn)為是患者死亡的重要原因之一。CAR-T細(xì)胞療法也會釋放大量的炎癥細(xì)胞因子，導(dǎo)致細(xì)胞因子風(fēng)暴和細(xì)胞因子釋放綜合征，IL-6和GM-CSF被認(rèn)為是治療的重要靶點。

GM-CSF作用機(jī)制
 

GM-CSF（Granulocyte macrophage-colony stimulating factor)是一種分泌型細(xì)胞因子，由多種細(xì)胞表達(dá)，如粒細(xì)胞、樹突細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等等。GM-CSF受體則表達(dá)于髓系細(xì)胞如粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等，由α、β兩條鏈組成。GM-CSF與受體結(jié)合形成十二聚體復(fù)合物，激活下游JAK-STAT、PI3K、NFκB通路。

GM-CSF功能
 

GM-CSF有廣泛的生理功能，主要促進(jìn)粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的生成、分化、激活、存活等，是肺泡中的一個關(guān)鍵穩(wěn)態(tài)因子，低水平情況下，用于肺泡巨噬細(xì)胞的發(fā)育和長期維持，GM-CSF缺失的情況下，產(chǎn)生肺泡蛋白病(PAP), 同時肺部巨噬細(xì)胞功能缺陷，增加肺部感染幾率。GM-CSF在免疫應(yīng)答中的作用主要是兩類：A.將成熟的髓系細(xì)胞極化為促炎表型；B.將祖細(xì)胞分化為髓系細(xì)胞，擴(kuò)增和動員到炎癥部位。

GM-CSF與疾病
 

GM-CSF廣泛的參與各類炎癥性疾病，尤其是細(xì)胞因子風(fēng)暴相關(guān)炎癥疾病（如CAR-T導(dǎo)致的急性呼吸窘迫癥）和自身免疫性炎癥疾病，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)和巨細(xì)胞動脈炎（GCA），因而成為治療這些疾病的重要靶點。

 

GM-CSF靶點藥物研發(fā)現(xiàn)狀
 

GM-CSF靶點目前尚無藥物獲批上市，有多個藥物處于處于臨床或臨床前研究階段，主要分為兩類：一類是GM-CSF抗體藥，另一類是GM-CSFR抗體藥。這些藥物在多種適應(yīng)癥取得了不錯的療效，其中關(guān)注度較高的是天境生物的TJM2，Kiniksa的mavrilimumab，Humanigen的Lenzilumab，GSK的otilimab。
 

Fig 5. 藥物研發(fā)現(xiàn)狀


GM-CSF靶點藥靶細(xì)胞模型

 

針對GM-CSF靶點機(jī)制研究、藥物研發(fā)和GM-CSF蛋白測活等需求，科佰生物推出hGM-CSF Effector Reporter Cell藥靶細(xì)胞模型，部分?jǐn)?shù)據(jù)展示如下：

hGM-CSF Effector Reporter Cell CBP74149

Figure 6. Dose Response of Recombinant Human GM-CSF in hGM-CSF Effector Reporter Cells (Clone 10).




Figure 7. Inhibition of hGM-CSF-induced Reporter Activity by hGM-CSF Neutralizing Antibody in hGM-CSF Effector Reporter Cells (Clone 10).


藥物靶點模型

 

報告基因細(xì)胞模型可以很好的反映分子作用機(jī)制，同時具備更小的變異性和更好的可操作性，已被中檢院及藥企廣泛應(yīng)用于抗體藥物生物活性的檢定，對于藥物研發(fā)、質(zhì)量控制、批次放行都有重要意義。

科佰生物公司十分重視研發(fā)創(chuàng)新，憑借細(xì)胞功能改造技術(shù)、高精度和靈活的基因編輯工具平臺，提供包括激酶，GPCR，免疫治療，耐藥等多類疾病靶點的藥物檢測細(xì)胞模型。目前已覆蓋四百多株現(xiàn)貨細(xì)胞模型，同時提供高質(zhì)量的Cell-base生物測活服務(wù)。

免疫治療靶點細(xì)胞模型
 

● T Cells Activation Assays (NFAT, IL2, NFkB….)

● Fc Effectors Activity Assays ( ADCC, ADCPs…)

● Immune Checkpoint Bioassays: Co-Inhibitory Targets (PD-1/PD-L1&2, TIGIT/CD155, CTLA4, LAG3, LILRB4/APOE, CD112R/CD112, SIRPa/CD47, TIM-3, BTLA/HVEM, CD161/CLEC2D, TIGIT&PD-1, LAG3&PD-1, CTLA4&PD-1 Combi…)

● Immune Checkpoint Bioassays: Co-Stimulatory Targets (OX40, 4-1BB, GITR, CD27, HVEM/LIGHT, CD28…)

● Cytokines and Growth Factor Assays ( BCMA, TGFβ, EGF, CSF1R, IL2, IL15, IL4&13, IL6, IL11, IL12, IL23, IL36, IFNs,RANKL…)

● Others (TLR family members, STING，A2A family members, SARS Cov2…)